胰岛素巯基化透明质酸纳米粒的制备与性质评价

【摘要】多肽类药物口服给药的研究一直是国内外药剂学研究者热衷的领域,但这类药物由于自身理化性质等特点,口服生物利用度低。这其中研究者尤为关注的是胰岛素。胰岛素是临床上治疗I型糖尿病的一线药物,但存在的突出问题是药物半衰期短,需长期频繁地注射给药。而胰岛素口服给药是一种患者顺应性好、服用方便的给药方式,符合内源胰岛素的分泌模式。然而,胰岛素直接口服给药时遭遇胃肠道酶降解以及膜透过性差等诸多障碍。生物黏附性聚合物纳米粒可以通过延长胃肠道药物滞留时间和减少胃肠道中消化酶对胰岛素的降解等方式,有效改善胰岛素口服生物利用度。本研究将生物黏附性聚合物透明质酸与L-半胱氨酸通过酰胺键连接制备了巯基化透明质酸(HA-Cys),其游离巯基含量为(225.7±4.4)μmol·g-1,核磁共振以及红外图谱确证了其结构。体外黏附性实验表明聚合物黏附性质良好。以HA-Cys为载体,采用超声乳化法,制备了载胰岛素的巯基化透明质酸纳米粒(Ins-HA-Cys-NPs)。通过单因素考察,确定了对Ins-HA-Cys-NPs影响较大的因素为油相、水相体积比,HA-Cys用量以及Ins用量,并通过星点设计-效应面优化法,以包封率、载药量、粒径以及多分散指数为评价指标,优化了纳米粒的制备工艺。最终得到的最优处方为水相、油相体积比为1：4.12,HA-Cys用量为25.95mg,Ins用量为8.04mg。通过激光粒度分析仪测定纳米粒粒径和分布,平均粒径(PS)为(178.5±0.75)nm,多分散系数(PDI)为0.214±0.01,Zeta电位(ZP)为(-38.47±0.46)mV；反相高效液相法测定纳米粒包封率和载药量,包封率(EE)为(48.85±0.66)%,载药量(DL)为(4.79±0.13)%。进行了纳米粒的形态观察、黏附性质、体外释放与抗酶降解特性的研究,评价了胰岛素巯基化透明质酸纳米粒的大鼠口服给药的降血糖效果。实验结果表明,所制得的Ins-HA-Cys-NPs外观圆整,且分布均一；制备的Ins-HA-Cys-NPs具有良好的体外黏附特性,黏蛋白与Ins-HA-Cys-NPs纳米粒混悬液混合后Zeta电位由(-17.32±0.38)mV下降到(-36.06±0.62)mV；与胰岛素溶液相比,Ins-HA-NPs及Ins-HA-Cys-NPs药物释放时间均延长；以胃蛋白酶、胰蛋白酶为代表,研究Ins-HA-Cys-NPs的抗酶解作用,说明Ins-HA-Cys-NPs具有较好的抗酶降解作用；药效学实验中,糖尿病大鼠口服Ins-HA-Cys-NPs后1-12h中,显示出平缓的降血糖效果,相对生物利用度为6.9%。
【作者】赵佳丽；
【导师】宋洪涛；
【作者基本信息】厦门大学，药理学，2014，硕士
【关键词】口服给药；胰岛素；巯基化透明质酸；纳米粒；

【参考文献】
[1]汪勇.嵌段共聚物直接碳化法制备多孔碳材料及电化学性能研究[D].兰州理工大学,2014.
[2]曹琴.川东高褶带三叠系深层卤水和温泉的水化学特征及成因[D].中国地质大学（北京）,地下水科学与工程,2014,硕士.
[3]赵国垒.油膜厚度测量的双色光干涉光强调制方法[D].青岛理工大学,机械设计及理论,2012,硕士.
[4]李娜.基于GIS的东部沿海城市气候舒适度评价[D].中国地质大学（北京）,地图制图学与地理信息工程,2014,硕士.
[5]吴小林.S半导体公司在制品库存控制研究[D].西南交通大学,物流工程,2014,硕士.
[6]张倩,王治和,景永霞.基于SQL的频繁模式挖掘算法[J].中原工学院学报,2005,06:48-50.
[7]周长健.山东省博兴县财政支农支出绩效评价体系研究[D].西安科技大学,工商管理,2014,硕士.
[8]田川亚莉沙.影响中国食品行业城镇消费趋势的因素[D].复旦大学,区域经济学,2012,硕士.
[9]陆佳政,蒋正龙,雷红才,张红先,彭继文,李波,方针.湖南电网2008年冰灾事故分析[J].电力系统自动化,2008,11:16-19.
[10]陈业伟.降质图像的变分贝叶斯超分辨算法研究[D].内蒙古大学,数学,2013,硕士.
[11]任雪梅.基于神经网络的机器人轨迹跟踪控制[J].控制与决策,1997,04:317-321+384.
[12]任玉萍.歌剧《迪多与伊尼》人物形象塑造分析[D].山东大学,西方音乐史,2013,硕士.
[13]傅锡洪.朱子鬼神观研究[D].复旦大学,中国哲学,2012,硕士.
[14]亓东欣.功耗均衡式50A恒流源关键技术研究[D].吉林大学,电路与系统,2013,硕士.
[15]王征.论英美公司法中董事会的商事决定权[D].华东政法学院,法律,2003,硕士.
[16]钱勇.亚硝酸腐蚀的多晶硅绒面结构[D].上海交通大学,光学工程,2013,硕士.
[17]钟金.信用证欺诈及相关法律问题研究[D].江西财经大学,经济法,2004,硕士.
[18]张慧.案外人执行异议审查程序实务研究[D].内蒙古大学,法律,2014,硕士.
[19]杨祝辉.200MW汽轮发电机烧瓦原因分析[J].发电设备.1989(01)
[20]尹东明.烧绿石（A_2Ti_2O_7）结构陶瓷材料的辐照效应研究[D].厦门大学,核科学与工程,2014,硕士.
[21]马媛媛.高中英语教学中的文化导入研究[D].渤海大学,学科教学（专业学位）,2014,硕士.
[22]周婧,李巧云,肖亮,蒋建雄,易自力.芒和五节芒在中国的潜在分布[J].植物生态学报,2012,06:504-510.
[23]和丽真.自动检票闸机拍打门控制系统研究[D].南京理工大学,测试计量技术及仪器,2013,硕士.
[24]王柄凯.小学摄影艺术教学实验与推广[D].沈阳师范大学,美术,2014,硕士.
[25]邢宗义.复杂工业过程的模糊建模与控制[D].铁道部科学研究院,2003.
[26]钱杨.在《人物》杂志采写人物特稿的实践总结和思考[D].浙江大学,新闻与传播,2013,硕士.
[27]陈爱林,张海东,杨青,任辉,姜玉磊,袁浩.变电站智能电子设备的动态重构技术[J].电力系统自动化,2014,13:182-186.
[28]刘敬.基于数字资源的问题引导式教学研究[D].华中师范大学,教育技术学,2013,硕士.
[29]林俊.ANXA6基因在胃癌中甲基化表达及其临床意义[D].浙江大学,肿瘤学,2013,硕士.
[30]冯立言.可见光诱导2,5-二苯基取代呋喃的合成研究[D].哈尔滨工业大学,有机化学,2014,硕士.
[31]薛茫茫.通过并购整合实现国有企业的战略性改组[D].重庆大学,工商管理,2003,硕士.
[32]崔熙.重庆市民办高校体育教育现状及发展对策研究[D].西南大学,体育人文社会学,2013,硕士.
[33]郑丽花.金融异化视角下的金融监管变革研究[D].首都经济贸易大学,金融学,2014,硕士.
[34]刘艳超.毛细管网吊顶辐射空调系统的开发及应用研究[D].天津商业大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2013,硕士.
[35]刘丹.基于C-MEMS的微纳结构的制备及其超级电容特性的研究[D].华中科技大学,机械电子工程,2013,硕士.
[36]贺浩.热处理工艺对Mg-13Gd-4Y-2Zn-0.6Zr合金组织及性能影响研究[D].中北大学,材料加工工程,2014,硕士.
[37]潘安.基于风格的智能服装款式结构CAD系统设计与实现[D].东华大学,2005.
[38]李静,王京,郝春辉,张勇军,李小占,温治.常化炉过程控制系统的研究与应用[J].冶金自动化,2009,02:17-23.
[39]汪阳.推进当代中国马克思主义大众化路径研究[D].南京师范大学,马克思主义基本原理,2012,硕士.
[40]丁同领.癌旁组织VEGFR-2、CD34表达与丙肝相关性肝癌根治术后早期复发相关性研究[D].福建医科大学,外科学,2014,硕士.
[41]黄樟友.物业税税收方案设计及其测算分析[D].浙江大学,2006.
[42]王子愿.新中国的政治仪式与国家认同的实现（1949-1956）[D].西南交通大学,中外政治制度,2013,硕士.
[43]张志国.基于Windows CE嵌入式控制系统的研究与设计[D].东华大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[44]曾华.针刺对肛肠病痔术后镇痛的临床研究[D].湖北中医药大学,中西医结合临床（专业学位）,2013,硕士.
[45]张珹.脉冲感应型高速牵引系统的初步研究[D].西南交通大学,车辆工程,2014,硕士.
[46]焦典.基因组序列特征分析[D].东南大学,2005.
[47]冷巧辉,马利,文东辉,鲁聪达,潘国庆.燃料电池双极板材料及其流场研究进展[J].机电工程,2013,05:513-517+523.
[48]赵乃东.信管专业网络工程实践教学课程体系建设方案的探讨[J].软件,2014,07:68-71.
[49]刘梅芳.中国汽车整车制造业产业国际竞争力影响因素的实证分析[D].南京农业大学,产业经济学,2011,硕士.
[50]赵宇.电子商务企业价格竞争策略研究[D].广西师范大学,工商管理,2013,硕士.